Link to Pubmed [PMID] – 31056419
Structure 2019 07;27(7):1082-1093.e5
Les pili bactériens de type 4a sont des filaments de surface dynamiques qui favorisent l’adhésion bactérienne, la motilité et le transport macromoléculaire. Leurs gènes sont hautement conservés parmi les entérobactéries et leur expression dans Escherichia coli entérohémorragique (EHEC) favorise l’adhésion aux épithéliums intestinaux et la signalisation pro-inflammatoire. Pour définir la base moléculaire de l’assemblage du pilus EHEC, nous avons déterminé la structure du domaine périplasmique de sa sous-unité principale PpdD (PpdDp), un prototype d’une sous-famille entérobactérienne de piline contenant deux liaisons disulfure. La structure de PpdDp, déterminée par RMN, a ensuite été ancrée dans l’enveloppe de densité des piliers EHEC purifiés obtenus par microscopie cryoélectronique (cryo-EM). La reconstruction Cryo-EM des pili EHEC à une résolution ∼8 Å a révélé une flexibilité extrêmement élevée du pilus en corrélation avec une grande région étendue de la tige du pilon. Une mutagenèse systématique combinée à des analyses fonctionnelles et d’interaction a identifié des résidus chargés essentiels à l’assemblage du pilus. Les informations structurelles sur les régions exposées et les interfaces entre les pilules EHEC sont pertinentes pour la découverte de vaccins et de médicaments.