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© Artur Scherf
Scanning Electron Microscopy of Red Blood Cell infected by Plasmodium falciparum.
Publication : Nucleic acids research

Terminal deoxynucleotidyl transferase requires KU80 and XRCC4 to promote N-addition at non-V(D)J chromosomal breaks in non-lymphoid cells

Domaines Scientifiques
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Publié sur Nucleic acids research - 27 Jun 2012

Boubakour-Azzouz I, Bertrand P, Claes A, Lopez BS, Rougeon F

Lien vers Pubmed [PMID] – 22740656

Nucleic Acids Res. 2012 Sep;40(17):8381-91

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) is a DNA polymerase that increases the repertoire of antigen receptors by adding non-templated nucleotides (N-addition) to V(D)J recombination junctions. Despite extensive in vitro studies on TdT catalytic activity, the partners of TdT that enable N-addition remain to be defined. Using an intrachromosomal substrate, we show here that, in Chinese hamter ovary (CHO) cells, ectopic expression of TdT efficiently promotes N-additions at the junction of chromosomal double-strand breaks (DSBs) generated by the meganuclease I-SceI and that the size of the N-additions is comparable with that at V(D)J junctions. Importantly, no N-addition was observed in KU80- or XRCC4-deficient cells. These data show that, in a chromosomal context of non-lymphoid cells, TdT is actually able to promote N-addition at non-V(D)J DSBs, through a process that strictly requires the components of the canonical non-homologous end-joining pathway, KU80 and XRCC4.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22740656