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© Laure Mancini
Neural stem cells of the zebrafish adult telencephalon visualized by confocal microscopy
Publication : Biology

A Multi-Site Assessment of Anesthetic Overdose, Hypothermic Shock, and Electrical Stunning as Methods of Euthanasia for Zebrafish (Danio rerio) Embryos and Larvae.

Domaines Scientifiques
Maladies
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Publié sur Biology - 01 avr. 2022

Mocho JP, Lang F, Valentin G, Bedu S, McKimm R, Ramos J, Saavedra Torres Y, Wheatley SE, Higgins J, Millington ME, Lundegaard PR, Chamorro Valverde R, Jenčič V, von Krogh K

Lien vers Pubmed [PMID] – 35453745

Lien DOI – 10.3390/biology11040546

Biology (Basel) 2022 Apr; 11(4):

Euthanasia in zebrafish (Danio rerio) younger than 5 days post fertilization (dpf) is poorly described in the literature, and standardized protocols are lacking, most likely because larvae not capable of independent feeding are often not protected under national legislations. We assessed the euthanasia efficacy in laboratories in different countries of a one hour anesthetic overdose immersion with buffered lidocaine hydrochloride (1 g/L, with or without 50 mL/L of ethanol), buffered tricaine (1 g/L), clove oil (0.1%), benzocaine (1 g/L), or 2-phenoxyethanol (3 mL/L), as well as the efficacy of hypothermic shock (one hour immersion) and electrical stunning (for one minute), on zebrafish at <12 h post fertilization (hpf), 24 hpf, and 4 dpf. Based on the survival/recovery rates 24 h after treatment, the most effective methods were clove oil, lidocaine with ethanol, and electrical stunning. For 4 dpf larvae, signs of aversion during treatment demonstrated that all anesthetics, except lidocaine, induced aversive behavior. Therefore, the most suited euthanasic treatment was lidocaine hydrochloride 1 g/L, buffered with 2 g/L of sodium bicarbonate and mixed with 50 mL/L of ethanol, which euthanized both embryos and larvae in an efficient and stress-free manner. Electrical stunning also euthanized embryos and larvae efficiently and without signs of aversion; this method needs further assessment in other laboratories to draw firm conclusions.