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© Yang SI, Institut Pasteur
Publication : Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)

DNA Methylation Analysis of ChIP Products at Single Nucleotide Resolution by Pyrosequencing®

Domaines Scientifiques
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Publié sur Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) - 01 janv. 2015

Moison C, Assemat F, Daunay A, Arimondo PB, Tost J

Lien vers Pubmed [PMID] – 26103908

Methods Mol. Biol. 2015;1315:315-33

Interaction and co-occurrence of protein and DNA-based epigenetic modifications have become a topic of interest for many fundamental and biomedical questions. We describe within this chapter a protocol that combines two techniques in order to determine the methylation status of the DNA specifically associated with a protein of interest. First, DNA that directly interacts with the selected protein (such as a specific histone modification, a transcription factor, or any other DNA-associated protein) is purified by standard chromatin immunoprecipitation (ChIP). Second, the level of DNA methylation of this immunoprecipitated DNA is measured by bisulfite conversion and Pyrosequencing, a quantitative sequencing-by-synthesis method. This procedure allows determining the methylation status of genomic DNA associated to a specific protein at single nucleotide resolution.