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© Sandrine Etienne-Manneville
Photo prise à l'avant (dans la protrusion) d'astrocytes primaires de rat en migration. Marquage par immunofluorescence montrant en rouge, p150 Glued, une protéine associée aux extrémités 'plus' des microtubules et en vert la tubuline des microtubules. La photographie montre l'accumulation de p150 Glued à l'avant des cellules en migration, où la protéine pourrait participer à l'ancrage des microtubules à la membrane plasmique. Pour essayer de corriger, les dérèglements observés lors de la migration des cellules d'astrocytes tumuraux ou gliomes on cherche à connaitre les mécanismes moléculaires fondamentaux qui controlent la polarisation et la migration cellulaires.
Publication : PloS one

Differential regulation of actin-activated nucleotidyl cyclase virulence factors by filamentous and globular actin

Scientific Fields
Diseases
Organisms
Applications
Technique

Published in PloS one - 12 Nov 2018

Raoux-Barbot D, Belyy A, Worpenberg L, Montluc S, Deville C, Henriot V, Velours C, Ladant D, Renault L, Mechold U

Link to Pubmed [PMID] – 30419035

PLoS ONE 2018;13(11):e0206133

Plusieurs agents pathogènes bactériens produisent des toxines nucléotidyl cyclase pour manipuler les cellules hôtes eucaryotes. À l’intérieur des cellules hôtes, elles sont activées par des cofacteurs endogènes pour produire des niveaux élevés de nucléotides cycliques (cNMP). La toxine ExoY de Pseudomonas aeruginosa (PaExoY) et le module de type ExoY (VnExoY) trouvés dans la toxine MARTX (Multifunctional-Autoprocessing Repeats-in-ToXin) de Vibrio nigripulchritudo partagent une similitude de séquence modeste (~ 38%) mais ont tous deux été récemment montrés à activer par l’actine après leur livraison à la cellule hôte eucaryote. Ici, nous avons en outre caractérisé la cyclase de type ExoY de V. nigripulchritudo. Nous montrons que, contrairement à PaExoY qui nécessite l’actine polymérisée (F-actine) pour une activation maximale, VnExoY est sélectivement activé par l’actine monomère (G-actine). Ces deux enzymes présentent également un substrat nucléotidique différent et des spécificités de cations divalents. In vitro en présence du cation Mg2 +, le PaExoY activé par F-actine présente une activité nucléotidyl cyclase promiscueuse avec la préférence de substrat GTP> ATP≥UTP> CTP, tandis que le VnExoY activé par G-actine montre une forte préférence pour l’ATP comme substrat, comme c’est le cas des toxines bien connues de l’adénylate cyclase activée par la calmoduline de Bordetella pertussis ou de Bacillus anthracis. Ces résultats suggèrent que les facteurs de virulence de la nucléotidylcyclase activés par l’actine malgré le partage d’un activateur commun peuvent en fait afficher une plus grande variabilité des effets biologiques dans les cellules infectées que prévu initialement. le PaExoY activé par F-actine présente une activité nucléotidyl cyclase promiscueuse avec la préférence de substrat GTP> ATP≥UTP> CTP, tandis que le VnExoY activé par G-actine montre une forte préférence pour l’ATP comme substrat, comme c’est le cas pour le bien connu toxines d’adénylate cyclase activées par la calmoduline de Bordetella pertussis ou de Bacillus anthracis. Ces résultats suggèrent que les facteurs de virulence de la nucléotidylcyclase activés par l’actine malgré le partage d’un activateur commun peuvent en fait afficher une plus grande variabilité des effets biologiques dans les cellules infectées que prévu initialement. le PaExoY activé par F-actine présente une activité nucléotidyl cyclase promiscueuse avec la préférence de substrat GTP> ATP≥UTP> CTP, tandis que le VnExoY activé par G-actine montre une forte préférence pour l’ATP comme substrat, comme c’est le cas pour le bien connu toxines d’adénylate cyclase activées par la calmoduline de Bordetella pertussis ou de Bacillus anthracis. Ces résultats suggèrent que les facteurs de virulence de la nucléotidylcyclase activés par l’actine malgré le partage d’un activateur commun peuvent en fait afficher une plus grande variabilité des effets biologiques dans les cellules infectées que prévu initialement.